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草鱼细胞内凋亡抑制蛋白多克隆抗体的制备和检测
发表时间：2013-09-15 浏览量：1333 下载量：552
| 全部作者： | 张小宁，邱倩，李慧，黄德军，张迎梅 |
| 作者单位： | 兰州大学生命科学学院 |
| 摘 要： | 目的：制备草鱼细胞内凋亡抑制蛋白（inhibitor of apoptosis protein, IAP）多克隆抗体，为进一步开展IAP时空差异表达分析、定位和胁迫条件下的抗凋亡功能研究奠定基础。方法：利用生物信息学技术手段设计IAP基因的特异性引物，扩增长度为996 bp的IAP基因片段，运用原核表达系统表达抗原，免疫新西兰大白兔，获得抗血清后，通过亲和纯化得到IAP蛋白特异性的抗体。结果：获得了高效价的IAP蛋白多克隆抗体，Western blotting可以检测到IAP在草鱼肝脏组织中的表达。结论：研究得到的IAP多克隆抗体可用于草鱼IAP表达检测、亚细胞定位及抗凋亡功能研究等。 |
| 关 键 词： | 动物学；多克隆抗体；原核表达；凋亡抑制蛋白；草鱼 |
| Title： | Preparation and assay of polyclonal antibody for inhibitor of apoptosis protein in Ctenopharyngodonidellus |
| Author： | ZHANG Xiaoning, QIU Qian, LI Hui, HUANG Dejun, ZHANG Yingmei |
| Organization： | School of Life Sciences, Lanzhou University |
| Abstract： | Objective: The present study aims to make the polyclonal antibody for inhibitor of apoptosis protein （IAP） in Ctenopharyngodonidellus. Methods: We designed a pair of specific primers for IAP gene in C.idellus using bioinformatics technology, amplified a 996 bp DNA fragment and introduced this IAP gene fragment into E.coli to express a fusion protein His-IAP which then was injected into New Zealand white rabbits to prepare antiserum. Finally, specific anti-IAP polyclonal antibody was obtained by affinity purification. Results: Immunoblot analysis confirmed that IAP protein could be detected in C.idellus liver by this anti-IAP polyclonal antibody. Conclusion: An IAP polyclonal antibody is gathered and can be used for expression detection, subcellular localization and anti-apoptotic function research of IAP protein in C.idellus. |
| Key words： | zoology; polyclonal antibody; prokaryotic expression; inhibitor of apoptosis protein; Ctenopharyngodonidellus |
| 发表期数： | 2013年9月第17期 |
| 引用格式： | 张小宁，邱倩，李慧，等. 草鱼细胞内凋亡抑制蛋白多克隆抗体的制备和检测[J]. 中国科技论文在线精品论文，2013，6（17）：1651-1656. |
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